Clonalidade para células B, Detecção por PCR, Vários Materiais

Orientações do cliente

Este exame é realizado somente com pedido médico, em fragmentos de tecido.

• Materiais colhidos fora do Fleury devem ser entregues conforme condições abaixo:
• Fragmento de tecido: deve ser enviado fixado em formol a 10%, incluído ou não em parafina, em recipiente apropriado, identificado com o nome do paciente.

Orientações necessárias

Este exame é realizado somente com pedido médico, em fragmentos de tecido.

• Materiais colhidos fora do Fleury devem ser entregues conforme condições abaixo:
• Fragmento de tecido: deve ser enviado fixado em formol a 10%, incluído ou não em parafina, em recipiente apropriado, identificado com o nome do paciente.

Processamento e adequação da amostra

AMOSTRA:

• Fragmento de tecido incluído ou não em bloco de parafina.

DISTRIBUIÇÃO:

• Fragmento de tecido não incluído em bloco de parafina:
• Não manusear;
• Enviar para o Setor de Anatomia Patológica (AP).
• Fragmento de tecido incluída em parafina:

AP (Anatomia Patológica):

Informação sobre o preparo das lâminas:

-- Não passar as lâminas em estufa;

-- Enviar 8 lâminas em branco com cortes de 4 micras em lâmina carregada positivamente (preferência lâminas TOMO – Roche).

• Não manusear. Encaminhar para o LARI.

Estabilidade da amostra:

Temperatura ambiente: 5 anos;

Refrigerada: 5 anos;

Congelada: Não aceitável.

Método

Reação em cadeia da polimerase (PCR) e detecção por eletroforese.

Valor de referência

Ausência de rearranjo gênico predominante em IgH (policlonal).

Interpretação e comentários

• Esse exame se destina ao diagnóstico de clonalidade em proliferações linfocitárias (pesquisa de rearranjo de cadeia pesada de imunoglobulinas - IgH - quando solicitado para linfoproliferação B, e pesquisa de rearranjo de receptor de células T - TcR - quando solicitado para doenças linfoproliferativas T).
• Proliferações linfóides T freqüentemente representam um desafio diagnóstico para o clínico, haja vista a inexistência de marcador fenotípico de clonalidade nesse subtipo celular. Da mesma maneira, algumas infiltrações linfóides tissulares compostas por células B representam dificuldade diagnóstica, particularmente naqueles casos em que não é possível a análise por citometria de fluxo e a reação imunoistoquímica para pesquisa de cadeias leves ou de imunoglobulinas funciona de maneira duvidosa. A resolução desses casos tem sido auxiliada sobremaneira por meio de estudos com técnicas moleculares.
• A técnica de PCR (reação em cadeia da polimerase) praticamente substituiu o método de Southern Blot para pesquisa de clonalidade em doenças linfoproliferativas, por ser mais rápido, de menor custo e aplicável a pequenas quantidades de material biológico. Um material habitual para análise por PCR é o oriundo de tecido fixado em formol e incluído em parafina. Em doenças clonais haverá a amplificação preferencial do segmento anômalo, produzindo banda única na análise após eletroforese.